הקדמה: מדוע שיטות Chromatographic הן אימפולס תגמול

בתעשיית התרופות, שיטות chromatographic הן עמוד השדרה של בקרת איכות, בדיקות יציבות ושחרור אצווה. סוכנויות רישום כגון מינהל המזון והתרופות האמריקאי (FDA) וסוכנות התרופות האירופית (EMA) דורשות כי נהלים אנליטיים לא רק מאומתים אלא גם עכבות: 0robustFLT:1) - אזהרות יקרות על פני שימוש שגרתי, אפילו כאשר שינויים קלים יכולים להתרחש, אפילו בדיקות רגולטוריות, כגון, כגון, כגון, לא התנגשויות, או בדיקות ביצועים ספציפיים, כגון, כגון, או ירידה של שיטות בקרה, כגון, גורמות, אזהרות, או גורמות, אזהרות, .

פיתוח שיטות chromatographic חזקות הוא גם מרכזי כדי להבטיח בטיחות המטופל ויעילות סמים. אי-ציות, מוצרים השפלה, וזמינות של רכיב תרופות פעיל (API) תוכן חייב להיות מוגדר באופן אמין.העלות של שיטה מפותחת גרועה היא גבוהה: משאבים מבוזבזים, ניתוחים חוזרים ופשרות פוטנציאליות של איכות המוצר. מאמר זה מספק מדריך סמכותי, צעד אחר צעד אחר צעד עבור מדענים, שיטה, מפתחים איכותיים, ובקרת אסטרטגיות יעילות באמצעות QCH2, חייב להשיג את הפיתוח הרגולטוריות.

הבנת מסגרת השיקום של שיטות Chromatographic

לפני תחילת פיתוח שיטת, חיוני להבין את ההנחיות הרגולטוריות הספציפיות החלות על המוצר שלך ואת שלב הפיתוח.

  • (FLT:0)ICH Q2(R1) "הההשתנות של נוהלי אנליטיקה: טקסט ומתודולוגיה"FLT:1 - זה מדריך מבוזר מגדיר פרמטרים אימות (דיוק, דיוק, ספציפי, הגבלת זיהוי, הגבלת הקוונטיות, לינאריות, טווח ועוצמה) ומספק המלצות על איך להעריך אותם.
  • (FLT:0) USP General Chapter <621 > "Chromatography" MPEGFLT:1 - פרק זה קובע דרישות תאימות מערכת, מגדיר התאמות מותרות לתנאים chromatographic, ונותן הדרכה על בחירת עמודה, הכנה לשלב נייד וזיהוי שיא.
  • (FLT:0)ICH Q14 "פיתוח נוהל אנליטי והתחדשות של Q2(R1)"ראה FLT:1 - בפיתוח, ICH Q14 מדגיש גישה שיטתית, מבוססת סיכון לפיתוח שיטות, כולל השימוש בפרופיל אנליטי (ATP) ואזור עיצוב אופרות (MODR) הוא תואם את תהליך אנליטי (P) ומושגים איכותיים (עיצוב) (עיצוב) ו-D (עיצוב) (עיצוב).
  • (FLT:0) FDA Guidance for Industry: "נוהלים אנליטיים ושיטות אימות לתרופות וביוטכנולוגיה"FLT:1 - זה 2015 הדרכה מפרט את הציפיות של ה- FDA להגשת שיטות אנליטיות ביישומים חדשים בחקירה של תרופות (IND) יישומים חדשים של תרופות (NDA), יישומי סמים חדשים מכוסים (ANDA), ויישומים ביולוגיים (BLA).
  • (FLT:0) מדריך מדריך אימות של נוהל אנליטית: 1 - בעודו פוגע במידה רבה עם ICH, EMA עשוי להיות ציפיות נוספות לגבי מחקרים של השפלה כפויה, הסתברות בלתי פתירה ואימות של שיטות חלופיות.

הבנת ההנחיות הללו אינה אופציונלית – הן מהוות את הבסיס של קבלה רגולטורית. שיטה חזקה היא זו שלא רק עומדת בקריטריונים של אימות שצוין, אלא גם עושה זאת באופן עקבי בתנאים המשקפים את השימוש המיועד.

פיתוח שיטות: יישום איכות-by-Design (QbD)

פיתוח שיטות מסורתיות התבסס לעתים קרובות על ניסויים בניסויי ניסוי וטרור ואחד-מספק-אט-א-זמן (OFAT) אופטימיזציה. בעוד מקובל על הפרדה פשוטה, גישה זו מניבה לעתים קרובות שיטות רגישות לריאציות קטנות בטור, שלב נייד או טמפרטורה. מסגרת QbD מתייחסת חולשות אלה על ידי חקר באופן שיטתי את החלל.

שלב 1: Define the Analytical Target פרופיל (ATP)

ה- ATP מגדיר את קריטריונים הביצועים כי השיטה חייבת להשיג לשימוש המיועד שלה.זה עונה לשאלה: "איזה שילוב של תכונות (למשל, החלטה, קצב זנב, דיוק, דיוק) חייב השיטה לספק?", לדוגמה, ATP עבור ATP עבור HPLC כפי שאומר של לוח עשוי להיות מצב: "השיטה חייבת לכמת את ה- API עם סטייה יחסית (RSD) 0%, בתוך דיוק, 98-0.

שלב 2: בחר את טכניקת Chromatographic

בחר בין HPLC, UPLC, GC, או טכניקות אחרות המבוססות על תנודתיות אנאלית, קוטביות ויציבות.עבור רוב התרופות, הפוך HPLC (RP-HPLC) נשאר סוס העבודה, אבל UPLC מציעה מהירות גבוהה יותר ורזולוציה כאשר גדלים חלקיקים מתחת 2 מיקרומטר משמשים.

שלב שלישי: בחירת שלב והתאמה

(הבחירה של העמודים היא ההחלטה הביקורתית ביותר.) להשתמש בגישה מובנית: עמודות המבוססות על סלקטיבית הידרופובית, פעילות סילנופול, ותוכן מתכתי.כלי כגון FLT:0Hydrophobic Subtraction ModelFLT:1 (עבור C18 עמודות) או עמודות FLT:2USP cellivity DatabaseFLT 3 יכול לעזור ל-plicaic).

שלב רביעי: Mobile Phase Optimization

אופטימיזציה pH, סוג מודול אורגני (בדרך כלל acetonitrile או methanol), ריכוז חיץ, ו פרופיל ⁇ . השתמש בעיצוב של ניסויים (DoE) כדי למפות את ההשפעה של pH ו% אורגני על שימור ורזולוציה.עבור תרכובות ionable, pH שליטה בתוך ± יחידות נדרש לעתים קרובות כדי לשמור על זמני שימור מעודכנים.

שלב 5: הכנת הדגימות

לפתח הליך הכנת דגימות המבטיח החילוץ המלא של ה-Virtit, הפרעה מינימלית מן המחפרים, ויציבות של תמצית.טכניקות נפוצות כוללות: פירוק בשלב הנייד (לדוגמא), מיצוי חד-פעמי מוצק (עבור זיהומים של עקבות), או החילוץ דילול-ו-ו-shoot עבור ביו-fluids. אימות הכנה בנפרד: להעריך התאוששות, ממטריקס אפקטים, ויציבות על זמן האחסון הצפוי.

שלב 6: מערכת החלפת סוללות

בדיקות תאימות מערכת (SST) הן בדיקת בנוי כי המערכת chromatographic מופיעה באופן מתקבל על הדעת בזמן הניתוח.על פי USP <621 & gt;, פרמטרים טיפוסיים כוללים: החלטה (R ⁇ 2.0 בין זוג קריטי), גורם זנב (T ⁇ 2.0), צלחות תיאורטיות (N ⁇ 2000), ודיוק ההזרקה (R.D ⁇ % עבור לפחות חמישה מחקרים אלה אינם יכולים להיות חסימתם על בסיס נתונים מאתגרים).

אימות ב Compliance with ICH Q2(R1) והתכונן ל-Q2(R2)

אימות הוא הראיות המתועדות לכך שהשיטה מתאימה למטרה המיועדת שלה.בעוד ICH Q2(R1) נותרה הסטנדרט, ה- Q2(R2) מתקרבת לגישה מחזור חיים שבה אימות אינו אירוע חד פעמי אלא רצף הכולל פיתוח שיטה, אימות ו ניטור ביצועים מתמשך.

המונחים: Forced Degradation

מפרט הוא היכולת למדוד באופן לאמביע את ה- אנאליט בנוכחות של רכיבים (placebo, זיהומים, מוצרים השפלה) לבצע מחקרים של השפלה כפויה בתנאים מתח (חומצה, בסיס, חום, אור, חמצון) כדי לייצר מוצרים השפלה ולוודא כי השיטה מפרידה אותם מן הפסגה העיקרית.

דיוק, אחריות ובינלאומית

(recovery) מוערכת על ידי ספירת כמויות ידועות של פייט לתוך פלצבו בשלושה רמות על פני טווח (למשל, 80%, 100%, 120%) Precision מוערכת כחזרה (שישה משוכפלים ב-100%) ודיוק ביניים (ימים אחרים, אנליסטים או עמודות) מראה דיוק עם RSD ⁇ 2% עבור ⁇ i) ולא לזהות את ה- 10% של כלי ה-AV.

קוארמיות, טווח וזיהוי / גבולות

קוארנטיות הודגמה על טווח המכסה את ריכוז הדגימה הצפוי (בדרך כלל 80-120% עבור אסימונים ומ- LOQ ל-120% מהגבול עבור זיהומים) חישוב המקדם הקורלציה, y-intercept, וסכום השוה של כיכרות.טווח הוא אימות על ידי דיוק ודיוק בקיצוניות.

רובוסטנס ומחוז העיצוב האופאלי של השיטה (MODR)

(הבדיקה של רובוסטנס היא אבן הפינה של שיטה אמינה.ICH Q2(R1) קובע כי יש להעריך את החוסן במהלך הפיתוח והוא נבדל מאימות, אבל Q2(R2) משלב אותו לאימות. פרמטרים אופייניים כדי להשתנות: שלב נייד (0.1-0.2 יחידות), טמפרטורה עמודה (5±C), ± (0.2 mL /min), ±D (אפקט משמעותי של צבע הרחם (R)

מסמכים והתפטרות

הגשת בקשה לחבילת הגשת מקיפה הכוללת דוח פיתוח שיטה, פרוטוקול אימות ודיווח סופי, מפרט התאמת המערכת, וכל מידע על פגיעה כפויה.תבנית חייבת לעקוב אחר מבנה המסמכים הטכניים המשותף (CTD): 3.2.S.4.1 עבור מפרטים, 3.2.S.4.2 עבור הליכים אנליטיים, ו-3.2.S.3 לאימות.) להצהרות ברורות לגבי העוצמה של השיטה והעיצוב (להלן: ALT2C.F) לדוגמה, לדוגמה, לדוגמה, לפי הוראות לגבי הקישור Ip.R.R.S.D.D.S.D.D.D.D.D.D.R.R.D.D.D.D.D.S.S.R.D.D.D.S.S.S.D) ו- ITP (להלן: ALT) לתקנות ה- IDD) לתקנות ה- ITP (להלן: ALT2 לתקנות ה- IDD) לתקנות ה- ITP (להלן: ALT2 עבור יישום .S.R.R.R.R.R.R.R.R.R.R.R.S.S.R.R.R.R.R.R.R.R

אסטרטגיות מעשיות לשמירה על רובוסטנטיות בשימוש ב-Routine

אפילו שיטה מפותחת ומתאמת יכולה להימשך לאורך זמן. ליישם את התרגילים הבאים כדי לשמור על יציבות:

  • (FLT:0) ניטור גדול:FLT:1ir כאשר הרבה עמודה חדש מוצג, reanalyze מערכת התאמת תקן והשוואה של זמני שימור, החלטה, וגורם זנב נגד נתונים היסטוריים.
  • (FLT:0) Monitor שלב pH: FLT:1 פתרונות Buffer צריכים להיות מוכנים כל יום טרי או כפי שהוכתב על ידי נתוני יציבות. השתמש ב- pH מ"מ ורשום את ה- pH לפני ואחרי ניתוח.
  • תוצאות התאמת המערכת:0 (FLT:1) השתמש ב ⁇ תהליך סטטיסטי (SPC) עבור פתרון ו RSD על פני אצילות.מגמה למעלה בגורם זנב עשוי להצביע על השפלה בעמודה.
  • (FLT:0) חוסן מחדש של אתגר: ההרחבה: (FLT) 1 שנתי, או לאחר שינויים משמעותיים בכלי, לבצע מחקר חזק בקנה מידה קטן (למשל, שלושה גורמים בשני רמות) כדי לאשר כי השיטה נשארת בתוך ה-MODR.
  • (FLT:0 אנליסטים: FLT:1) ודא כי כל המפעילים לעקוב אחר ההליך הכתוב המדויק.אפילו סטייות קטנות כגון שימוש במותג אחר של vial או צינורות יכול להשפיע על דיוק.

מסקנה

פיתוח שיטות chromatographic חזקות עבור תאימות רגולטורית אינה משימה אחת - זהו תהליך ממושמע, שיטתי שמתחיל בהבנה ברורה של ציפיות רגולטוריות ומסתיים עם ניטור רציף. על ידי אימוץ גישה איכותית בעיצוב, הגדרת פרופיל אנליטית, ובדיקה מעמיקה של המרחב העיצוב של השיטה באמצעות תכנון ניסויים, מדעני תרופות יכולים ליצור שיטות לעמוד מול נוקשות של QC בדיקה שגרתית ואימות (Rt) הוא כל מערכת ההפעלה הקריטית של Q2CH היא פעולה.

חברות שמשקיעות בבניית שיטות חזקות רואות פחות ניתוחים כושלים, עלויות בדיקה נמוכות יותר, אישורים רגולטוריים מהירים יותר, והכי חשוב, יותר ביטחון איכות סמים.הפניה ל-FLT:0) ה-FDA בנוגע להליכים אנליטיים של ההרחבה 1:1 וה-FLT:2USP:2USP chromatography פרק <621 >FLT 3 עבור הדרישות הנוכחיות.