Ферментация в производстве натуральных пищевых красителей и добавок
Table of Contents
Древнее искусство встречается с современной наукой
Ферментация является одной из старейших пищевых технологий человечества, с археологическими свидетельствами ферментированных напитков, датируемых более 8000 лет. На протяжении тысячелетий культуры по всему миру полагались на микробную активность для сохранения пищи, улучшения вкуса и улучшения усвояемости. В последние десятилетия этот древний процесс нашел мощное новое применение: производство натуральных пищевых красителей и добавок. По мере того, как потребители все чаще отвергают синтетические красители в пользу ингредиентов, которые они могут распознавать и доверять, ферментация предлагает масштабируемый, устойчивый и химически чистый путь к ярким, стабильным пигментам. В отличие от экстракции из целых растений — которая может быть ресурсоемкой и изменчивой по сезону и географии — ферментация использует контролируемый микробный рост для производства последовательного, высокопродуктивного красителя круглый год. Этот подход полностью согласуется с движением чистых ярлыков, уменьшает зависимость от химии на основе нефти и открывает двери для новых оттенков, которые трудно получить с помощью традиционной экстракции.
Наука о цвете через ферментацию
В своей основе ферментация использует метаболический механизм микроорганизмов для преобразования простых субстратов в сложные вторичные метаболиты. Многие из этих метаболитов являются пигментами —молекулы, которые поглощают определенные длины волн видимого света и отражают другие. Наиболее коммерчески значимые классы пигментов, полученные путем ферментации, включают каротиноиды (желтый-красный-красный), антоцианы (красный-фиолетовый-синий), беталайны (красный-желтый) и фикоцианины (синий). Микроорганизмы производят эти соединения для своего собственного выживания — в качестве УФ-защиты, антиоксидантов или сигнальных молекул — но ученые в области пищевых продуктов научились оптимизировать условия для максимизации выхода пигмента.
Ключевые биохимические пути
Три основных биосинтетических пути ответственны за большинство красителей, полученных при ферментации. мевалонатный путь и метилэритритфосфатный путь генерируют изопреноиды-предшественники, которые приводят к каротиноидам, таким как ликопин, бета-каротин и астаксантин. фенилпропаноидный путь производит флавоноиды, включая антоцианы, которые дают ягоды, красную капусту и фиолетовую кукурузу их характерные цвета. Многие микроорганизмы— в частности бактерии, дрожжи и нитевидные грибы— естественно обладают этими путями, и ученые могут усилить их посредством селекции штаммов, генетической оптимизации и точного контроля температуры, pH, кислорода и доступности питательных веществ.
Микроорганизмы, используемые в коммерческой ферментации
В настоящее время в промышленной ферментации для производства цветов используется широкий спектр микробов.Каждый организм предлагает уникальные преимущества с точки зрения профиля пигмента, скорости роста, гибкости субстрата и нормативного принятия.
бактерии
Флавобактерии хорошо известны производством зеаксантина, желтого каротиноида, используемого в кормах для птицы и пищевой окраске. Паракокк каротинифациенс является ведущим источником астаксантина, красного пигмента, ответственного за окраску лосося и креветок. Стрептомицеты штаммы производят ряд синих, красных и желтых поликетидных пигментов, хотя некоторые требуют тщательной очистки из-за потенциала для совместно производимых антибиотиков. Лактобациллы и другие молочнокислые бактерии способствуют красным и розовым оттенкам в ферментированных овощах и молочных продуктах посредством синтеза антоцианин-производных пигментов, часто в синергии с растительными предшественниками.
Дрожжи
Дрожжи особенно привлекательны для производства красителей, потому что многие из них, как правило, признаны безопасными (GRAS) и имеют хорошо зарекомендовавшие себя протоколы ферментации. Blakeslea trispora является нитевидным грибом — технически дрожжевой гриб, похожий на плесень — который производит высокие урожаи ликопина и бета-каротина. Phaffia rhodozyma (теперь Xanthophyllomyces dendrorhous ) синтезирует астаксантин естественным образом и широко используется в аквакультуре и пищевой краске. Saccharomyces cerevisiae был разработан для производства различных каротиноидов, флавоноидов и даже беталаинов с помощью метаболической инженерии,
Несгибаемые грибы
Грибы, такие как Aspergillus niger, Penicillium, и Monascus purpureus, на протяжении веков использовались в восточноазиатской кухне для окрашивания красного рисового вина, тофу и мяса. Однако некоторые штаммы монастырского ореха совместно производят цитринин, микотоксин, поэтому для применения в пищевой промышленности требуется строгий отбор штаммов и их очистка.Fusarium venenatum, уже известный производством микопротеинов, был исследован на предмет его пигментного потенциала. Исследования продолжают выявлять безопасные, высокоурожайные грибковые штаммы, которые могут работать в различных субстратах, включая сельскохозяйственные отходы.
Виды ферментационных красителей
Коммерческие натуральные красители теперь охватывают почти весь видимый спектр, и ферментация стала основным методом производства нескольких ключевых пигментов.
каротиноиды
Каротиноиды являются наиболее коммерчески важным классом, с ликопином, бета-каротином и астаксантином, ведущим на рынке. Ферментация дает эти пигменты в очищенной, часто более стабильной форме по сравнению с экстракцией растений. Астаксантин из Paracoccus carotinifaciens и Phaffia rhodozyma ценится за его интенсивный красный цвет и антиоксидантную потенцию. Бета-каротин из Blakeslea trispora обеспечивает источник провитамина А наряду с его окрасочными свойствами. Ликопин, связанный с томатным красным, все чаще производится путем ферментации, чтобы уменьшить зависимость от побочных продуктов переработки томатов и достичь последовательной чистоты.
антоцианы
В то время как большинство антоцианов все еще извлекаются из фруктов и овощей, ферментация предлагает дополнительный путь. Escherichia coli и Saccharomyces cerevisiae были разработаны с генами растительного происхождения для производства специфических антоцианов, включая производные дильфинидина и цианидина. Эти платформы биосинтеза позволяют производить антоцианы, недоступные из природных источников, таких как определенные ацилированные формы, которые обеспечивают превосходную стабильность при низком pH и в присутствии света.
Беталайны
Беталайны и мдаши; красно-фиолетовые бетацианины и желтые бетаксантины, содержащиеся в свекле, амаранте и кактусовых фруктах и мдашах; могут быть получены дрожжами, экспрессирующими ферменты цитохрома P450 растительного происхождения. Этот подход устраняет земляные, связанные с геосминами не-вкусы, связанные с экстрактами свеклы, и обеспечивает более чистый, более концентрированный пигмент. Разработанные штаммы S. cerevisiae теперь производят беталайны в титрах, которые являются коммерчески жизнеспособными, с дополнительным преимуществом нейтрального вкусового профиля.
Фикоцианин и другие голубые пигменты
Синий является наиболее сложным натуральным цветом для производства в масштабе, и ферментация возникла как перспективное решение. Фикоцианин, синий пигмент из цианобактерий и красных водорослей, традиционно извлекается из биомассы Спирулина , но ферментированное культивирование Артроспира тромбоцис позволяет более контролируемое и эффективное производство. Кроме того, бактериальный пигмент виолацин (глубоко фиолетово-голубой) из Хромобактерия violaceum и Джантинобактерия ливидум находится под следствием как стабильный синий краситель, хотя одобрение регулирующих органов все еще находится на рассмотрении во многих регионах.
Приложения в пищевой промышленности
Цветовые добавки и красители, полученные из ферментации, попадают в расширяющийся спектр категорий продуктов питания и напитков. Их естественное происхождение в сочетании с часто превосходящей стабильностью по сравнению с экстрагированными пигментами делает их привлекательными как для разработчиков продуктов, так и для потребителей.
Напитки
Мягкие напитки, спортивные напитки, фруктовые соки и алкогольные напитки используют каротиноиды и антоцианы, полученные путем ферментации, для достижения ярких красных, оранжевых, желтых и фиолетовых оттенков. Астаксантин и бета-каротин особенно популярны в соковых смесях и смузи, где они способствуют как цвету, так и антиоксидантным требованиям. Кислый рН большинства напитков способствует стабильности антоцианов, что делает ферментированные антоцианы идеальным выбором для прозрачных и пасмурных напитков.
Кондитерские изделия и запеченные товары
Конфеты, чайки, морозильники и выпечка получают пользу от теплостойкости и переносимости рН пигментов, полученных путем ферментации. Ликопин из триспоры Blakeslea остается стабильным благодаря выпечке и экструзии, обеспечивая постоянный красный оттенок в печенье, пирожных и закусочных. Беталайны из инженерных дрожжей предлагают чистую альтернативу экстрактам свеклы в зефирах и твердых конфетах без земляного послевкусия. Фикоцианин и инженерные синие антоцианы позволяют первое поколение действительно синих натуральных кондитерских изделий.
Молочные и растительные альтернативы
Ферментированные молочные продукты, такие как йогурт, кефир и сыр, имеют естественную синергию с красителями, полученными из ферментации. Производство антоцианов, приводимое в действие ферментацией, может быть интегрировано в сам фермент, создавая розовый или фиолетовый йогурт без добавления красящего ингредиента. В растительном молоке, йогуртах и сырах также используются каротиноиды и фикоцианин, чтобы соответствовать ожиданиям потребителей окраски. Растущий спрос на растительные молочные альтернативы ускорил принятие пигментов, полученных из ферментации, поскольку эти продукты часто не имеют естественной пигментации аналогов животного происхождения.
Мясо и продукты Savory
Обработанное мясо, аналоги мяса на растительной основе и пикантные закуски используют красители для воспроизведения внешнего вида вареного мяса. Астаксантин и ликопин обеспечивают розовые до красных тонов в колбасах, гамбургерах и ломтиках дели. Ферментация, полученная из паприки олеоресина (капсантина) из Капсикума, предлагает последовательный, концентрированный красный цвет без изменчивости полевой паприки. В растительном мясе красители должны выживать при приготовлении и поддерживать свой оттенок наряду с реактивными белками и жирами; пигменты, полученные из ферментации, часто превосходят простые экстракты в этих требовательных условиях.
Преимущества перед синтетическими красителями
Переход от синтетических красителей к натуральным обусловлен потребительским спросом, нормативным давлением и растущим объемом исследований, связывающих определенные синтетические красители с проблемами здоровья. Цвета на основе ферментации предлагают уникальный набор преимуществ в этом ландшафте.
Здоровье и безопасность
Синтетические пищевые красители, такие как красный 40, желтый 5 и синий 1, были предметом дебатов относительно потенциальных связей с гиперактивностью у детей и других неблагоприятных эффектов. Цветные красители, полученные из ферментации, напротив, производятся микроорганизмами, которые являются ГРАС или имеют долгую историю безопасного использования в пище. Многие из этих пигментов также обладают внутренними антиоксидантными, противовоспалительными или противомикробными свойствами, добавляя функциональное преимущество за пределами цвета. Например, астаксантин является мощным антиоксидантом, связанным со здоровьем кожи и иммунной поддержкой, а антоцианы связаны с сердечно-сосудистыми и когнитивными преимуществами.
Устойчивость
Ферментация использует значительно меньше земли, воды и энергии по сравнению с сельским хозяйством для пигментных растений. Один ферментатор из нержавеющей стали может производить больше ликопина за одну неделю, чем гектар урожая помидоров в сезон. Субстраты для ферментации могут включать сельскохозяйственные побочные продукты, такие как кукурузный крутой ликер, патока и пшеничные отруби, превращая потоки отходов в ценные пигменты. Углеродный след ферментации также ниже, чем у синтетического производства красителей, которое часто полагается на предшественники нефтяного происхождения и производит токсичные отходы. Поскольку экологические, социальные и управленческие критерии становятся более важными для пищевых компаний, ферментация предлагает четкий путь к улучшению показателей устойчивости.
Восприятие потребителей и маркировка
Потребители сканируют списки ингредиентов на наличие незнакомых химических веществ. Цвета, полученные из ферментации, часто могут быть помечены как «натуральный цвет», «овощной сок» или просто название пигмента (например, «ликопин», «бета-каротин»), которые потребители признают и доверяют. Ассоциации «био» и «ферментированный» также несут положительные коннотации кустарного качества и здоровья. Напротив, синтетические красители должны быть перечислены по их химическим названиям или номерам FD & C, которые многие потребители рассматривают отрицательно. Бренды, которые переходят на красители на основе ферментации, могут продавать этот сдвиг как приверженность натуральным ингредиентам, часто оправдывая ценовую премию.
Функциональные преимущества
Многие пигменты, полученные при ферментации, обеспечивают преимущества стабильности по сравнению с их экстрагированными аналогами. Каротиноиды, производимые триспорой Blakeslea и Paracoccus carotinifaciens, часто находятся в стабилизированной, этерифицированной форме, которая сопротивляется окислению и деградации света лучше, чем свободные каротиноиды из растений. В инженерных беталаинах из дрожжей отсутствуют ферментные системы, которые приводят к потемнению пигмента в экстрактах свеклы. Фикоцианин из контролируемой ферментации улучшил термическую стабильность, что позволяет использовать его в таких приложениях, как выпечка и горячие напитки, которые ранее были запрещены для синих натуральных цветов.
Проблемы в коммерческом производстве
Несмотря на обещание ферментационных красителей, для них необходимо преодолеть ряд технических и экономических препятствий, чтобы конкурировать с синтетическими красителями в масштабе.
Стабильность и последовательность
Микробные системы производства — это живые фабрики, и их выход может варьироваться с незначительными изменениями условий. Поддержание последовательного выхода и качества пигмента в партиях требует строгого контроля производительности штамма, состава среды, pH, температуры, растворенного кислорода и времени сбора урожая. Многие природные пигменты также чувствительны к экстремальным значениям света, тепла и pH; даже если работа ферментатора совершенна, готовый пигмент должен быть сформулирован, чтобы выжить в целевой пищевой матрице и ее условиях обработки. Инкапсуляция, эмульсия и матричная инженерия являются активными областями исследований для продления срока годности и диапазона применения цветов, полученных из ферментации.
Масштабируемость и стоимость
Хотя ферментация по своей сути масштабируема, экономика является сложной. Синтетические красители стоят копейки за килограмм, в то время как натуральные красители могут стоить в десять-сто раз больше. Расходы на разработку штаммов, оптимизацию среды и оборудование для ферментации высоки, а очистка нижнего течения для удаления биомассы, остаточных питательных веществ и любых совместно производимых не ароматизаторов добавляет дополнительные расходы. Экономия масштаба улучшается по мере инвестиций в сектор, но цветные красители, полученные из ферментации, остаются премиальным ингредиентом. Стратегии снижения затрат включают использование недорогих субстратов, увеличение титра пигмента посредством разработки штаммов и развитие непрерывных или высококлеточных процессов ферментации.
Регуляторные проблемы
В Соединенных Штатах FDA требует, чтобы любое вещество, добавленное в пищу, было признано безопасным (GRAS) или одобрено в качестве пищевой добавки. Многие пигменты, полученные в результате ферментации, достигли статуса GRAS благодаря самоутверждению или уведомлению FDA, но процесс является длительным и дорогостоящим. В Европейском союзе натуральные красители должны быть разрешены в качестве пищевых добавок (E-номера) и соответствовать строгим критериям чистоты. Новые красители, производимые генетически модифицированными микроорганизмами, сталкиваются с еще более высоким регуляторным контролем, требующим обширных исследований безопасности и, в ЕС, одобрения в соответствии с новым регламентом пищевых продуктов. Эти нормативные расходы являются значительным барьером для входа для мелких производителей.
Будущие направления и инновации
Область быстро развивается, а исследования и коммерциализация ускоряются по всей цепочке создания стоимости.
Инженерия и биоразведка
Метаболическая инженерия и синтетическая биология открывают новые границы. Ученые используют CRISPR и другие инструменты редактирования генов, чтобы выбить конкурентные пути, повысить регулирование синтеза пигментов и ввести целые пути пигментации растений в безопасные, быстрорастущие микробные хозяева. Результатом является растущая библиотека штаммов, которые производят специфические пигменты при высоких титрах, с минимальными побочными продуктами. Биопоиск и поиск новых пигмент-производящих микробов в экстремальных условиях, таких как горячие источники, глубоководные вентиляционные отверстия и арктический лед. дает новые пигменты с уникальной стабильностью и цветовыми свойствами. Цель - палитра натуральных цветов, которые могут соответствовать цене, производительности и разнообразию синтетики.
Оптимизация процессов
Достижения в области биопроцессостроения снижают затраты. Непрерывная ферментация, при которой добавляются свежие среды и непрерывно собирают продуктсодержащий отвар, может повысить производительность и сократить время простоя по сравнению с пакетными процессами. Поточные датчики для pH, растворенного кислорода и концентрации метаболитов позволяют контролировать и оптимизировать в режиме реального времени. Также улучшается обработка в нисходящем потоке с мембранной фильтрацией, центробежной хроматографией разделов и адсорбционной смолой, обеспечивающей восстановление пигментов высокой чистоты без использования органических растворителей. Эти инновации сужают разрыв в стоимости синтетическими красителями.
Новые приложения за пределами еды
Те же платформы для ферментации, разработанные для пищевых красителей, находят применение в косметике, фармацевтике, текстиле и кормах для животных. Астаксантин для лосося и креветок уже является крупным рынком, а в секторе кормов для домашних животных растут каротиноиды, полученные путем ферментации. Тенденция к чистому маркированию распространяется на продукты личной гигиены, где натуральные пигменты из микробных источников заменяют синтетические красители в помадах, тенях для глаз и лосьонах. По мере развития технологии межсекторальные применения будут способствовать дальнейшему масштабированию и снижению затрат на пигменты пищевого качества.
Заключение
Ферментация переопределяет то, что возможно в мире натуральных пищевых красителей и добавок. Используя микробный метаболизм, промышленность может производить яркие, стабильные и безопасные пигменты, которые отвечают требованиям современных потребителей и регуляторов. Преимущества неоспоримы: польза для здоровья, устойчивость, прозрачность чистых этикеток и функциональное превосходство, которые часто превосходят как синтетические красители, так и растительные экстракты. Проблемы остаются в стоимости, стабильности и одобрении регулирующих органов, но быстрый прогресс в разработке штаммов, оптимизации процессов и биоразведке неуклонно сокращает разрыв. По мере того, как глобальная продовольственная система переходит к ингредиентам, которые являются более здоровыми для людей и планеты, ферментационные красители выделяются как решение, основанное на традициях, основанное на науке и готовое к будущему.
Для дальнейшего чтения по регуляторным аспектам см. FDA Food Additive Status List и EFSA Food Colours руководство. Всесторонний обзор микробных пигментов доступен через документ в области биотехнологических достижений. Перспективы отрасли в отношении тенденции к чистой марки освещаются IFT’s Food Technology magazine.