Kromatografide Örnek Dürüstlük: A C Kapsamlı Bir Kayıp ve Kirlenmenin İncelenmesine İlişkin Kılavuz

Kromatografi, analitik iş akışı boyunca örneklerin bütünlüğüne bağlı olarak, küçük örnek kaybı veya konsensiyonel analizlere ve farmasötik sonuçlara yönelik farmasötik kontrolden kaynaklanan bileşenlere yol açıyor.Bu makale, örnekleme kalitesi boyunca örneklerin bütünlüğüne bağlı olarak, küçük örnek kaybı veya konsensiyonel verilerin her vadede sağlam, yanlış anlaşılmalara yol açıyor.

Örnek kaybının etkisini anlamak ve Contamination

Kombinasyon örneğinin sonuçları tek bir başarısız enjeksiyonun ötesine uzatılır. Örnek kaybı, orijinal örneği yansıtmıyorsa, hedef bileşiklerin en yüksek düzeydeki etkileri, algılama limitleri yapay olarak yüksek ve duyarlılığın kaybı. - Bu nedenle, yanlış pozitiflere, analyte zirvelere müdahaleye ve veriye müdahale etmek.

Chromatography'de Örnek Kayıpların Yaygın Kaynakları

Konteyner Yüzeyleri Üzerine Bağlanma

Örnek kaybının en yaygın nedenleri, örneğin, düşük ücretli steroidleri veya otosampler konteynerleri için temel olarak sorunludur. Bu, özellikle hidrofobik bileşikler için, peptler veya kutup analitler, düşük hacimli plastik yüzeyler gibi malzemelerden yapılmış olabilir.Örneğin, düşük hacimli yüzeylere ek olarak, cam veya polipropilen maddelere yol açan veya yüksek çözünürlükte 10 ila 50 azaltılabilir.

Volatilization and Evaporation

Metalik sıvılar, organik çözücüler, ışık hidrokarbonlar veya belirli metalleşmiş bileşikler gibi, örnek hazırlık ve depolama sırasında buharlaşmaya karşı çıkmak ve kapalı kapaklar kullanarak örnekler etkili bir şekilde karşılanır.Son zamanlarda bile, baş uzaylar azalırken, aşırı derecede değişkenli kapaklar kullanarak, manyetik kapaklar ile ısıtılır.

Kimyasal Degradasyon ve Instability

Birçok anestezi, doğal olarak çevre koşulları altında kararsızdır. Fotodegradasyon, hidrolysis, oxidasyon veya enzymatik aktivite, analyteyi farklı bir türe dönüştürebilir, örneğin, sulfonamid antibiyotiklerin asitli çözümlerde bozulabilir, bazı pestisitler su bazlı betonlar için hidrostatiksel yüzeylerde dengeler içermelidir.Bu şekilde savaşmak için, stabilizatörler (antioksidanlar, chelatörler), kontrol eder pH, örneğin ışıktan örnekler koruyabilir ve analiz süresiz olarak yapılmalıdır.

Transfer sırasında fiziksel kayıplar

Her zaman bir örnek transfer edilir - koleksiyon konteynerinden bir asl'e, dillendirme sırasında veya otomatik taşlama sırasında - transfer adımlarının en aza indirmek için yöntemler vardır.Incomplete transfer, oturmalı sıvı boru duvarlarına bağlanır veya şarj edilebilirlik ve iyileşme sağlar.

Kiriş Sebepleri

Önceki Enjeksiyonlardan İzin Alın

Yüksek kodlu ortamlarda, taşıma - daha önceki bir örnek miktarı yüksek kontrastlı bir numunenin altında, güçlü çözücüler, tubing veya sütun ile otomatik olarak kalır - bu, geniş bir dinamik aralığı analiz ettiğinde, düşük konsensüs örneği yüksek kontrastlı bir numuneyi analiz eder.

Notlar ve Reagents

Reagent-grad çözücüler genellikle stabilizatörler, metaller veya ayrıştırma ürünleri, kromatografiye müdahale edebileceklerdir.Görüntü düzeyinde analiz için HPLC-grad veya LC-MS-grad çözücüler zorunludur. Daha sonra bile, kondüktörlerden plastikler, şişe ketenlerden gelen antioksidanlar veya sütun kanamalardan gelen nitroxtan gelen nitrojenler her zaman bir parlamentoitsiz bir şekilde hazırlanabilir.

Laboratuvardan çevresel Contamination from the Laboratory

Laboratuvar havası, örnek hazırlık için özel bir laminar akışı kullanarak, bu katkıları düzenli olarak temizleyerek veya bu örnekleri kullanarak elde edilebilir. Dust, cilt flakes ve parmak izleri ortak kaynaklardır.Teste hazırlık için özel bir laminar akışı kullanarak, temiz odalarda pozitif baskıyı korumak ve tozsuz eldivenler giymek bu katkıları azaltabilmektedir.

Biyolojik Konminasyon

Mikrobial büyüme, özellikle de oda sıcaklığında saklanan keskinler, hassas matrikler için metabolitler veya tüketebilir. Bu, biyolojik sıvılar, gıda ekstraları veya çevresel sular için özel bir endişedir.

Örnek Kayıplık için En İyi Uygulamalar

Konteyner Seçimi ve Tedavi

Türlü malzemenin seçimi kritiktir.Ücretsizler için (Döneticiler)[Döneticiler için), cam transkriptler (aileler veya soda-lime) genellikle uygun, ancak gerekli olan, kimyasal bir uyumluluk grafiği ile devre dışı bırakılırsa ve eksoratörlü bir kombinasyon için bir kurtarma testi yapılır.

Optimized Enjeksiyon Teknikleri

Borulama doğruluk doğrudan örnek kaybı etkiler. Kalibrate boruttelar düzenli olarak ve borunun spesifikasyon aralığı (örneğin, 100-1000 μL borutograf için aşırı düşük bir son değil) Kromatografiye göre, kısmi döngü doldurma tekniği, bu hassaslığı kullanarak atıkları azaltabilir.

Transfer Adımlarını Yeniden Üretin

Her transfer potansiyel kaybı getirir.Inline örnek hazırlık teknikleri, katı-faksiyon (SPE) doğrudan LC sistemine (online SPE), orta transferleri ortadan kaldırır. manuel transferler kaçınılmaz olduğunda, viskous örnekleri ve düşük devrelerle çalışır.

Küçük Ciltler ve Yüksek Dilution Faktörleri Yönetimi

Çok küçük örnek hacimlerle çalışırken (örneğin, <10 μL), buharlaşma ve adsorpsiyon şiddetli hale gelir. Küçük bir hacimin iyileşmesini sağlamak için konical altları kullanarak düşük hacimli eklemeler kullanın.

Konminasyon Önleme Önleme Stratejileri

Rigorous Temizlik Protokolü

Konminasyon, tekrarlanabilir laboratuvarware'ten kaynaklanabilir. katı bir yıkama döngüsü takip edebilir: ilk lavabo ile yıkanır (örneğin, eh), sonra bir enjeksiyon çözümü ile temizlenebilir, ultrapure su ile yıkanır ve bir çözücülü camware ile belirli bir analyte tiplerini kullanarak, çapraz-kontaminasyondan kaçınmak için.

Yüksek Enerjili Şöfütler ve Katkılar Kullanımı

Her zaman çok izlenebilirlik ve analiz sertifikaları ile kaynak çözücüler. LC-MS için, uçucu tampon tuzların kullanımı (örneğin, ammonium format) düşük metal içeriği önerilir. Filtreler tüm mobil aşamaları UV-absorasyonları kaldırmak için 0.2 μm membranı kullanın.

Ölçme ve Filtreleme

Kısmi madde clog sütunları ve enjekte kapakları, basınç artışları ve kirlenmeye yol açabilir.Her zaman 0,5 μm veya 0,5 μm filtreyi örnek matrisle uyumlu hale getirir. Ancak, filtrasyonun filtreyi filtreye veya yağ asitlerine eklediğine dikkat edin - veya minimum hacimler kullanın.

Laboratuvar Çevre Kontrolleri

Toz ve hava yoluyla buharları kolayca kirlenme kaynaklarını görmezden gelir. Kapalı konteynerler iç desiccators veya inert-gas p, hava hassas bileşikleri ele alırken odaları talep etti.En azından, yüksek volüme (örneğin, asitler, üsler veya uçucu çözücüler) ile ilgili olarak, özel temiz odalarda (Class 100 veya daha iyi) belirli bir şekilde düzenlenmiş veya ifşa edilenler için uygun fiyatlı olabilir.

Geliştirilmiş Örnek Dürüstlük için Gelişmiş Teknikler

Otomatik Örnek Hazırlık Hazırlık

Otomasyon insan hatası ve değişkenliği azaltır, reproditeability. Robotik sıvı eller doğrudan iç standartların ekleri ve manuel transferlerin hava ve yüzeylere maruz kaldığı yüksek oranda faydalı olur.

Inert Surfaces and Passivation

Konteyner kaplamasına ek olarak, kromatografi sisteminin tüm sıvı yolu, analytes'in bozulmasına neden olabilir.Bir nitrik asit yıkama ile paslanmaz çelik yüzeylere tedavi edilebilir (örneğin,% 50 HNO3 için 30 dakika) formlar için, kromatopyum oksit tabakası ile devre dışı bırakılır, metal-catalyzediyozların bozulması için, organik asitler ve metal tüplü yüzeyler için kullanılan farmasötik malzemeler için önemlidir.

İç Standartlar ve Surrogates

Örnek kaybı telafi etmenin en iyi yolu, hedef ana olarak eklenmiş olan içsel standartları (IS) kullanmaktır; Bir ideal ISrogate standartları, temizlenmeden önce örneklere benzerdir (örneğin, istikrarlı izope-labeled). IS has been allowedes the same lost and complex matrices.

Kalite Kontrol ve Yöntem Veri Güvenilirliği sağlamak için Geçerlilik

En iyi uygulamaların seti resmi kalite kontrolü yerine gelir. Her korromatografik yöntem, sistem uygunluk testleri (örneğin, saat hassasiyet, zirve alanı tekrarlanabilirlik ve teorik plakalar) Daha önceki enjeksiyonların% 0.1'ini kullanarak, doğrulayıcı eylem (örneğin, 80-12% kurtarma) tekrarlanabilir sınırlar içinde kontrol edilir.

Yöntem geçerliliği sırasında, birden fazla koşulla ilgili stabilite çalışmaları yürütmek: oda sıcaklığında kısa vadeli depolama, uzun vadeli depolama -20°C, donmuş çevrimler ve otomatik olarak kayıt dışı stabiliteler için sürekli olarak devam eden bir yöntemdir.

Düzenlenen endüstrilerde, Analytical Prosedürleri (ICH) gibi yönergeleri takip edin.(ICHT) ve FDA ile bağlantı kurunu (ENDÜSÜyetim) ve [[DÜye Olmayanlar için Sık sık belirli konteyner malzemeleri, ön koruyucular ve zaman tutar[Döneticileri gösterir.) Bu belgeler, örnekleme protokolleri ve kurtarma deneylerinin kesin belgelenmesini gerektirir.

Kromatografide Kalite Kültürü Yapın

Sonuçta, örnekleme kaybı ve kirlenmesi bir zamanlar kontrol listesi değil, sürekli bir taahhüt. Tüm personel örnek bütünlüğü ilkeleri üzerinde eğitim, net standart işletim prosedürleri (SOPs), ve periyodik denetimler yapmak gereklidir.Rektörlerin anormalliği rapor etmeye, araştırma nedenleri ve uygulamaları düzeltmeye gücü yeten bir kültürdür. Örnek bütünlük uzlaşmaya neden olur, kök neden analiz eder (örneğin, balık kemiği diyagramları, 5 Nedenleri) analiz eder.

Burada belirtilen stratejileri bütünleştirerek - konteyner seçimi ve otomatik örneklemeden, titiz kalite kontrolüne hazırlık - işbirliği yapanlar modern analiz tarafından talep edilen yüksek seviyeli veri kalitesine ulaşabilir. Örnek kaybı ve kirlenme, bir kez kaçınılmaz olarak kabul edilebilir seviyelere indirgenebilir, daha fazla geri dönüşümlülük, güven ve düzenleyici uyum için yol açabilir.

En iyi uygulamalar hakkında daha fazla okuma için, [[0)LCGC kaynakları örnek hazırlık[Dönetici:0) ve [[Dönetici analizinde örnek kirliliği önleme üzerine makale [DDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDD) ek bilgiler ve vaka çalışmaları sağlar.