Суперкритична хроматографія рідини (SFC) виникла як потужна і універсальна техніка в аналітичній хімії, зокрема для аналізу складних ліпідів і жирних кислот. За останні десятиліття інновації в приладуванні, технології колон і виявлення пропелиних SFC з методу нішу в основний струмовий інструмент для ліпідоміки, контролю якості їжі і біофармецевтичної характеризації. Його здатність відокремити неволатель, термоліг, а структурно різноманітні ліпідні види з високою швидкістю і низьким споживанням розчинника робить його привабливим альтернативою гастрономічній хроматографії (GC) і рідкої хроматографії (LC). Ця стаття відгуки про принципи, що проявляються в майбутньому, технічні, технічні принципи, технічні, що проявляються, технічні характеристики, технічні характеристики, сучасні технології, сучасні жирні кислоти, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, технічні характеристики, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології, сучасні технології,

Основи суперкритичної флейтидної хроматографії

SFC використовує надкриту рідину — найчастіше вуглекислий газ (CO]2]) — як мобільну фазу. Над критичною температурою (31.1 °C) та тиском (73.8 бар), CO2] вводять стан, де він експонує газоподібну в'язкість та дифузійність, що поєднує в собі рідке сорбуючу потужність. Це унікальне поєднання дозволяє швидко перенести масу та ефективне поділу асинхронів з широким діапазоном поляризаторів. Стійкість суперкритого тиску здійснюється за допомогою полярних CO[

Останні технологічні досягнення

Висока роздільна здатність Мас-спектрометрія (HRMS)

Складання СФК з високою роздільною здатністю мас-спектрометрії — так як чотирирупольно-часове‐освітлення (Q‐TOF) та інструментів для орбітра — революціонованого ліпідного профілю. HRMS забезпечує точні вимірювання маси (<1 ppm) that enable confident identification of lipid species and their regioisomers. For example, SFC‑MS/MS workflows can distinguish between ]sn]‐1 і sn]‐2 жирні кислоти в триацилгліцеролах, критична потреба в харчовій та метаболічній дослідження. Останні

Розширені стаціонарні фази та колонні хімії

Технологія колони значно розвивалася для вирішення поділу складних ліпідних сумішей. Звичайні блідо-кремні кремнію або фази C18 доповнюються стрункими фасонами з індивідуальним вибірковим виділенням для поділу ліпідів. Наприклад, 2‐етилпіридин (2‐EP), діол, а пропілметино-циклопедичні фази пропонують ортогональну вибірковість для фосфоліпідів, гліколіпідів та нейтральних ліпідів. Sub‐2-Mm повністю використовує пористі частинки та поверхнево-порні (core‐shell) забезпечують високу ефективність при підтримці помірного задреси. Нездатні інновації - це розвиток [[Fg‐FLT[F1P1]

Автоматизація та високоточні платформи

Сучасні системи SFC включають в себе автозбільшувачі, здатні обробляти багато зразків, точні регулятори зворотного тиску (BPR), і клапани для розсіяного аналізу. Ці функції дозволяють високопроекторні робочі процеси, необхідні для масштабних досліджень когорта або контролю якості. Мініатюровані системи SFC, іноді терміновані капілярні або мікро-SFC, зменшити споживання розчинника до мікролітерів на ходу і дозволяють співвідношенні з нано‐ESI‐MS для підвищення чутливості. Програмне забезпечення для розробки автоматизованих методів, що швидко оптимізує модифікатор градієнт, температура і тиск, тепер інтегровані на комерційні платформи, налаштування методу скорочення часу.

Застосування в ліпідному та жирному аналізі кислот

Ліподоми та біомаркером Discovery

Незабутні ліпідами мета полягає в комплексно профільних видів ліпідів у біологічних матрицях. СФК-МС виявляє тут, тому що вона може відокремити ліпіди по всьому діапазону поляризації в одному пробігу. У дослідженні Бамба і т в Аналітична хімія] використовується SFC‐MS для профілю ліпідів у сироватці, що охоплюють вільні жирні кислоти, фосфори, і triacNALD печінки, які використовуються для лікування, що застосовуються 2

Контроль якості харчових продуктів та аутентифікації

Жирна кислота склад є ключовим детермінантом харчового значення та полки-ліття в їстівних маслах, молочних продуктах та переробних продуктах. SFC забезпечує більш швидкий аналіз жирних кислот ефірів метилових (FAMEs) порівняно з традиційними методами GC, з часом запуску часто протягом 10 хвилин. Крім того, SFC може безпосередньо проаналізувати вільні жирні кислоти і акілгліцероли без дериватизації, спрощення підготовки зразків. Останні роботи наносять SFC‐UV для кількісного очищення омега‐3 і омега‐6 жирних кислот в рибних олійних капсулках, досягаючи відносних відх відхил нижче 2 %. Техніка також використовується для виявлення дорослих маслинів для виявлення оливкової олини

Клінічні та діагностичні програми

У клінічних лабораторіях SFC набирає тягу для кількісного визначення жирних кислот і ліпідів, пов'язаних з ненародженими помилками обміну речовин і серцево-судинного ризику. Плазм вільних жирних кислот (FFA) профілі вимірюються для оцінки інсулінорезистентності і діабетичних ускладнень. SFC‐MS‐MS дозволяє одночасно визначати FFA, гідрокси‐, і оксиліпини, які є біологічно активними ліпідними медіаторами. Останні частинок в Talanta], що дозволяє надійні кипліни в людських лімітах з плазми з плазмифікафікацією / плазми

Ліпідний метаболізм і біохімія рослин

Розуміння біосинтезу ліпідів у рослинах, водоростей, мікроорганізмів є важливим для виробництва біопалива та оздоровлення харчових продуктів. SFC‐MS дозволяє швидко аналізувати мембранні ліпіди, зберігання ліпідів та їх прекурсорів. Дослідники використовували SFC для профілю гліколід та фосфоліпідів у мікроалгаї при різних умовах росту, виявлення того, як поживний стрес змінює накопичення ліпідів, — критично для оптимізації врожайності алгічного біодизеля.

Порівняння традиційних методів

У порівнянні з хроматографії газу (GC), SFC дозволяє уникнути необхідності дериватизації нетермотивних ліпідів, зберігає тепло-лабіальні сполуки (наприклад, поліненасичені жирні кислоти з багатьма подвійними зв'язками, окислені ліпіди), а також використовує менші експлуатаційні температури. Однак GC все ще пропонує чудове рішення для простих FAME і залишається метод посилання для жирової кислоти в багатьох нормативних налаштуваннях. SFC, з іншого боку, може проаналізувати неточні триацилгліцероли і полярні ліпіди, які недоступні GC.

Відносна для рідких хроматографії (LC, особливо реверс-фаз), SFC забезпечує більш швидкий аналіз часу (типово 5–15 хвилин проти 20–60 хвилин для ліпідомних LC-проходжень), використовує менш органічний розчинник, і часто дає більш високі пікні форми для ліпідів, які, як правило, хвіст в LC. Трейд-офф є те, що полярні ліпіди, такі як сильно кислотні фосфоліпіди, можуть вимагати відсотки високого модифікатора, що зменшує надкритичну природу мобільного фази, частково зменшуючи переваги SFC. Тим не менш, останні розробки в хімія стовпців пом'якшили це обмеження.

Виклики та рекомендації щодо розвитку методології

Незважаючи на свою міцність, SFC для ліпідного аналізу представляє певні проблеми. Розчинність дуже ліофілічних сполук у надкритичній CO2 може бути обмежена; добавки, такі як ацетат ацетат аміки або амієві кислоти часто необхідні для поліпшення пікової форми і іонізації в MS. Підбір стовпців критичний — пористо підібрані фази можуть призвести до співустанови ліпідних класів. Метод перенесення між інструментами може бути складним завдяки відмінності в BPR проектування і мертвих обсягах. Стандартизація часу затримки через лабораторії все ще відходить за ЛК і ГК, хоча останні міжреабілітативні дослідження починаються до цієї адреси. Нарешті, вартість навчання може бути спеціалізовані комплексні системи високого тиску.

Перспективи майбутнього

У статті розглянуто наступні хвилі інновацій в SFC для ліпідного аналізу, ймовірно, зосереджені на декількох областях. Спочатку інтеграція спектрометрії іонних рухів (ІМС) з SFC‐MS додає додатковий вимір поділу на основі перерізу зіткнення, що дозволяє дозвіл на земні ліпіди, які котелять в хроматографічному вимірі. По-друге, відкритітрубки (капілярні) SFC колонки з внутрішніми діаметрами 25–50 мкм пообідати навіть швидше розділів і споживання нижніх зразків. Трекінг, розробка портативних або польових систем SFC, можливо, використовуючи кріогеномі безпровідні технології, що можуть бути використані для харчової промисловості.

Висновок

Ультракритична хроматографія рідини зріла в надійний, високопродуктивний інструмент для аналізу ліпідів і жирних кислот. Останні досягнення в чутливості датчика, вибірковості стовпців і автоматизації розблокували додатки, починаючи від клінічних біомаркерів до перевірки автентичності їжі. Хоча проблеми залишаються в стандартизації інструменту і передачі способу, постійне розвиток нових стаціонарних фасонів, гіфенованих методів, а мініатурізовані системи пропонує перспективний майбутнє. Як попит на більш швидке, зелене, і більш інформативний аналіз ліпідів, SFC добре позиціонується доповнити - і в деяких випадках замінити -традиційні GC і LC методології в аналітичній лабораторії.