הרנסאנס של פעילות מיקרוביאלית

תסיסה מיקרוביאלית הייתה אבן הפינה של ביוטכנולוגיה במשך יותר ממאה שנים, מהייצור של פניצילין בשנות ה-40 ועד לייצור המודרני של אנזימים, דלקים ביולוגיים ותרכובות טעם.בשנים האחרונות, עם זאת, התכנסות של פריצות דרך בביולוגיה סינתטית, הנדסה מטבולית ולמידה יש תנודות גבוהות לתוך פלטפורמה המסוגלת לייצר ספקטרום:0 אורגניות טבעיות של חומרים מסוכנים אלה הם לעתים קרובות חומרים כימיים רגישים לכימיקליים נדירים.

מאמר זה חוקר את ההתקדמות המשמעותית ביותר המניעה את הרנסאנס הזה, בוחן מפתח המאפשר טכנולוגיות, ומדגיש את הרפרטואר ההולך וגדל של מוצרים טבעיים מורכבים נגישים כעת באמצעות תסיסה מיקרוביאלית.זה גם מדבר על האתגרים ההנדסיים הנמשכים, הופעתה של ללא תאים ובגישות ישיבה, ואת הדרך קדימה כמו שדה בוגר מהוכחה אקדמית למציאות מסחרית.

ארכיון התגים: The Modern Fermentation Platform

(ב) , (ב) , ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇

פלטפורמת התוססת המודרנית משלבת ארבעה עמודי תווך:

  • [01:2] ,[עריכת קוד מקור]: הרחבת לוחות הייצור מעבר ל[FLT]:2E. colicioFLT 3 ו- esto לכלול אקטינומיצ'טים, פטריות מפוכח ואפילו תאים ממאמניים.
  • (FLT:0)Genome כרייהFLT:1: באמצעות ביונופורמטיקה כדי לגלות אשכולות הגן הביוסינתזה שקטים או מטושטשים (BGCs) מדנ"א סביבתי ומטאגנומים.
  • (ב) [ה]השער המחודש [ה]: [ה], [ה], [ה], [ה], [ה], [ה],] [ה], [ה]], [ה], [ה], [ה], [ה],], [ה],], [ה], [התחילה] את ה'], [ה'.
  • (FLT:0) תוצאות שיפור העצמתי: שילוב תסיסה מזין עם הסרת מוצרים שבשבו, האכלה רציפה וניתוח בזמן אמת כדי למקסם את הפרודוקטיביות הנפחית.

אלמנטים אלה יחד מאפשרים ייצור של מוצרים טבעיים מורכבים בקנה מידה החל מ מיליגרם ניסויים קליניים כדי מטר טון עבור כימיקלים של סחורות.

הנדסה גנטית: מ Gene Cluster מספק עיצוב CRISPR-Enabled

CRISPR-Cas9 ו- Beyond: Precision Editing of Biosynthetic Pathways

(ב) [[1924]]]], [[1924]]]]]], [[1924]]]]]], [[1924]]]]]], [[1924]]]]]], [[1924]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]

אופטימיזציה של Pathway Metabolic Pathway והנדסת מודולרי

מעבר לעריכה גנטית, אופטימיזציה של מסלול מטבולית משתמשת במערכות ביולוגיה וביולוגיה סינתטית כדי לבנות מסלולים חזקים, גבוה lux. אסטרטגיות מפתח כוללות:

  • (ב) ,0) ,Dynamicrea תקנה FLT:1: בניית ביוסנסורים השולטים בביטוי גנים בתגובה לריכוזים מטבוליטים, מניעת בניית ביניים רעילים.
  • (FLT:0)ScaffoldingFLT:1: אנזים קו-קליזציה באמצעות הפיגמומים סינתטיים של חלבון כדי לתעלת ביניים ולהקטין את ההפסד בשל דיפוזיה.
  • (ב) [ה]הההבנה של ה[[המאה ה-1]]: ייצור הנדסי לאיברלים (למשל, חומרים רעילים בכבשים) לצעדים ביו-סינתזה נפרדים מתהליכים תאיים מתחרים.
  • (ב) ,0) הנדסה מספקת (FLT:1): איזון NADPH, ATP, וספקים אחרים לתמיכה ביוסינתזה אנרגטית.

דוגמה ציונית היא ייצור של FLT:0 â € lkaloidsFLT:1 (morphine, Codeine) בהנדסת esast, אשר דרשה את ההרכבה של מעל 20 אנזימים heterologous צמחים, חיידקים, וצעקות' על ידי המרה מודולרי הנדסה מודולרית כל אחד מארבע פלחמי ביניים - הסקי, הסקטורת הרטי, מורפיום, מסלול זרם הרחם-ה-מנטלי, ביולוגיה קיצונית, ומיקרו-פרי-מסלולארי, ביולוגיה-מולקולאריתמטיתמטית 2, ביולוגיה מתקדמת, ביולוגיה מתקדמת, .

(ב) , (ב) ,ב[[1924]]]] ו[[1924]]]]

בעוד ש-FLT:0. . coveliFLT 1 ו-"הצעקות" של אופה נותרו מרכיבים, הם לא תמיד הבחירה הטובה ביותר עבור מוצרים טבעיים מורכבים.פוליקטידים רבים ו peptsomal peptides דורשים שינויים לאחר translational (גליקולציה, הידרוקסילציה, מתילציה) כי הם נעדרים ב prokaryotes כתוצאה מכך, השדה יש אימוץ של תיק הייצור הגדל של המארח:

  • (ב) [ה]] [ה]]: [ה] מקורם המקורי של אנטיביוטיקה רבים, אלה של בני האדם בעלי אופי חזק מסוג I וסוג II PKS מערכות והם באופן טבעי מדגימים מטבוליטים מורכבים.
  • (ב) ויקרא י"א): "[ה]" (ב] ב':2 [ה], ב[ה], ב[ה], ב[ה], ב[ה], ב[ה], ב[ה], [ה], [ה] ב[[1924]], ב[[1924]],]], [[1924]],]] ו[[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]], [[1924]]]], [[1924]]]]]]]]]], [[1924]]]]]], [[1924]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]] [[[[1924]]]]]]
  • (ב) [ה]] [ה]]: [ה] [ה] [ה]] [ה]]] [ה]]]] [ה'] [ה']][ה']]]]]] [ה'[ה]'[ה']'[ה']'[ה']'[ה']'[ה']'[ה']'[ה'[ה']']'[ה'[ה']']'[ה'[ה']'[ה'[ה']'[ה'[ה'[ה']']']'[ה'[ה'[ה'[ה']']']']'[ה']']'[ה'[ה'[ה'[ה']']']']']'[ה'[ה']'[ה'[ה']'[ה']']']'[ה']']'[ה'[ה'[ה'[ה']']'[ה']']'[ה'[ה'[ה'[ה'[
  • (ב) ויקרא י"א): "[ה]" (ב"ה, כ"ד:2BacillusFLT 3: 3): חקרו לייצור של פפטידים מיקרוביאליים ולאנטיביוטיקה עם יצירת לוואי מופחתת.
  • (ב) [15] ויקרא ויקרא י"ד:2PseudomonasFLT 3: חקרו את יכולתם לטפל במינויים רעילים ולהרכיב מזון זול כמו לינין או מפלסטיק.

כל מארח מביא יכולות ייחודיות - FLT:0 (הספקומונים) 1 עבור מחזור מורכב, פטריות לשינויים חמצון, ו-FLT:2PichiaphilLT 3: עבור תסתות בעלות גבוהה - אבל גם אתגרים ייחודיים: צמיחה איטית יותר, פחות כלים גנטיים, ויעילות נמוכה יותר.

תגיות: דור חדש של מוצרים טבעיים מורכבים

אנטיביוטיקה מורכבת: להרגיע את תור הזהב

המשבר האנטיביוטיקה עורר עניין מחודש בייצור אנטיביוטיקה טבעית מעורפלת שנזנחה בשנות החמישים-70, משום שקשה להם לסנתז או לחלץ.סית מיקרוביאל עכשיו מציעה דרך להחיות את המולקולות הללו.

  • (FLT:0)DaptomycinFLT:1: אנטיביוטיקה אופניים אופניים אופניים בשימוש נגד פתוגנים דקדוקיים עמידים חיובי.
  • (ב) [[1924]]]]]] [[1924]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]], [[1924]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]] [[1924]] [[1924]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[1924]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]]] [[[[1924]]]]]] [[[[1966]]]]]]]] [[[[1924]]]]]] [[[[1924]]]]]] [[[[1924]]]]]]]] [[[[1924]]]]]] [[[[1924]]]]]]]]]] [[[[[[[[1924]]
  • (ב) [ה]: [ה] [ה]] [ה]] [ה]]] [ה]]][ה]]]][ה]]]][ה]]]]]][ה]]]]][האנטיביוטיקה של ה-FLT], אשר מעכבת את ה-FLT של תאי גזעים (=2-[[המאה ה[[המאה ה[[המאה ה[[המאה ה[[המאה ה-20]].

יתר על כן, שילוב ביוסינתזה טריטוריאלית - ערבוב והתאמה של אשכולות גנים - יכול לייצר אלפי אנלוגיות חדשות ל-nature.לדוגמה, החלפת דומיין ההעברה של מודולים PKS הביא עשרות נגזרות אריתרומיציצין חדשות עם תכונות פרמקולוגיות משופרות.

סוכני אנטי-סרטן: מצמחים שורשים לביולוגיים

חלק מהתרכובות האנטי-סרטן החזקות ביותר הן מטאבולטים משניים של צמחיים.סיסמציה מיקרוביאלית מספקת כעת גישה מדרגית למולקולות אלה:

  • (ב) ⁇ :0 (ב) ⁇ (ב) ⁇ : ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇
  • (ב) [ה]: [ה] [ה]] [ה] [ה]: [ה] [ה] [ה]]] [ה]]: [ה][ה]]] [ה]] [ה]] [ה']: [ההה] [הה] [ההההה] [ההההההה]] [ההתחילה] [ה]]] [ה]] [ה] [ה] [ה]]] [ה]]] [ה] [ה] [ה] [ה] [ההה] [ה] [ה]]]] [ה]]] [ה] [ה]] [ה]]]]] [ה] [ה[ה[ה[ה[ה[ה[ה]]]]]]]]]]] [ה[ה[ה[ה[ה]]]]] [ה]]]]] [ה]]]]]] [ה[ה[ה[ה[ה[ה]]]]]]]]]]]] [ה[ה[ה]]] [ה[ה
  • (ב) [ה][דרוש מקור]]: [ה] מקרו-קליד [ה] מספוגים ימיים עם פעילות אנטי-פרו-חיים של פימולרין BFLT:1hil: [Halaven] הוא תרופה פולית-מקרואידית, אך המוצר הטבעי דורש עשרות שלבים סינתטיים של מיקרוביאלרן B במהנדסים ב-F:2Fligen, אם כי הוא עדיין לא היה מפגין קידוד נמוך.

מוצרי טבע ביואקטיביים לחקלאות ולתעשייה

הפלטפורמה תסיסה תומכת גם בייצור מוצרים טבעיים המשמשים כחומרי הדברה, עשבי מרפא ואנזימים תעשייתיים:

  • (ב) [ה]: [ה] [ה]]: [ה] [ה] [ה] [ה]]] [ה]]]], [ה]][ה]]]]][ה]]], [ההההההההההההההההההההההההההההההההההתחמיכותה"] ה" (ה"ב"ב"ב"ה"ה"ה"ה"ב"ב"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ב"ב"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ב"ב"ב"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ב"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"ה"
  • (ב) ⁇ (ב) ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇
  • (ב) ⁇ :0 (ב) ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ ⁇

פרספקטיבה עתידית: Machine Learning, Cell-Free Systems ו-Frementation

Machine Learning for Pathway Design and Optimization

המורכבות של חילוף החומרים המיקרוביאלי - עם מאות אנזימים, אלפי metabolites, אינטראקציות לא לינאריות - עושה מסורתי ניסיון-וטרור הנדסה איטית ויקרה.מודלים של Machine (ML) משמשים יותר ויותר לחזות את ההשפעות של שינויים גנטיים, אופטימיזציה מדיה, ואפילו עיצוב מסלולים סינתטיים.

מערכות ללא תאים: Unlocking Impossible Chemistry

הנדסה מטבולית ללא תאים (CFME) מציעה אלטרנטיבה לחיים תסיסה עבור המוצרים הטבעיים המורכבים ביותר.על ידי lysing תאים ושימוש תמצית גס וכתוצאה מכך - או אנזימים מטוהרים - פעולות מתרחשות ללא קירות תאים, membranes, או דרישות צמיחה.

  • רכיבים רעילים לתאי חיים (למשל, אנלוגי חומצה שומנית אנטי-סרטן רבים).
  • דרכים עם הרבה דברים שאינם מובנים או מאזן של חמצון אדום שקשה להשיג (FLT:0) ב vivoFLT:1.
  • מהירויות מהירות של וריאנטים (זמני החזרה של שעות במקום שבועות).

מערכות ללא תאים שימשו לייצור קנבינואידים, אופיואידים, ואפילו את המאקרו-קלייד המורכב pikromycin. עם זאת, קנה מידה נשאר אתגר משמעותי: האכלה של ATP ו NADPH היא יקרה, ואנזימים מתפוגגים לאורך זמן.התקדמות בהתחדשות משביעת רצון (למשל, באמצעות פוליפוס kinase) ו אנזים מתחילים לטפל במגבלות אלה, ו-Falation נמוך יכול להיות יעיל עבור מוצרים:

רצף מתמשך ו-Situ Product Recovery

התסיסה המסורתית סובלת מקצב גבוה ועלויות מוצר לא עקביות.התרסה מתמשכת - שבו מוסיפים אמצעי תקשורת טריים ומרק הוסרו בו זמנית - שימש במשך עשרות שנים עבור מטבוליטים ראשוניים כמו אלנול, אך הוא פחות נפוץ עבור מטבוליטים מורכבים בשל סחף גנטי, רגישות של זוגות חמורים (אך הסיכון של זיהום) עם זאת, כמה התקדמות לאחרונה ב-F:0continalstrirdemreas (כלומר, במיוחד עם חומרים צמחיים) עם חומרים כימיים ריקים (מתאים).

אתגרים וגדרות לשיווק

למרות ההתקדמות המדהימה הזו, המכשולים המשמעותיים נותרו לפני שרבים מהמיקרובים המהנדסים הללו הופכים למונים תעשייתיים.

  • (FLT:0) , תשואה, ופרודוקטיביות הם לעתים קרובות מדי נמוך יותר מדי ההרחבה 1: עבור מוצרים טבעיים מורכבים (MW >1000 Da), titers בטווח המיקרוגרם-per-liter הם נפוצים, בעוד שכדאיות מסחרית דורשת בדרך כלל > 1 גרם / L. Bridging הפער הזה דורש אופטימיזציה סימולטנית של שלבים מרובים, פיזיולוגיה מארחת, עיבוד למעלה.
  • (FLT:0) חוסר יציבות גנטית (FLT:1): BGCs הם לעתים קרובות מגה-בסיס גדול, ניתן לאבד או להשתיק לאחר דורות רבים, במיוחד בתרבות רציפה.
  • (FLT:0) דמי עיבוד הזרם של עיבוד הזרם 1FLT: מיצוי וטיהור הידרופילי, טעון, או מוצרים טבעיים ממרקת תסיסה יכול להיות יקר יותר מאשר התסיסה עצמה.קדמה ב * *בשבת * שחזור מוצר (למשל, באמצעות שני-phase Partition bioreactors) הם עוזרים, אבל יש צורך במכוניות טיהור יעיל עלות עדיין.
  • (FLT:0) רגולציה ונוף קניין רוחני: מוצרים טבעיים הם לעתים קרובות פטנטים לפני עשרות שנים, ונתיבי ייצור חדשים עשויים להפר תביעות של הרכב-חומר.בנוסף, אם האורגניזם המהנדס הוא מיקרוב מהונדס גנטית (GMM), המכילה ותקנות שחרור סביבתית משתנות ברחבי העולם, מה שהופך את הגדלה.

הגבול של הפורמנטציה: The Fermentation Frontier

תסיסה מיקרוביאלית עברה רנסאנס, המועצמת על ידי ניתוח גנטי עם CRISPR, העיצוב הרציונלי של מסלולים מטבוליים, ואת הופעתה של ביולוגיים אינטליגנטיים.טווח של מוצרים טבעיים מורכבים עכשיו נגישים - החל אנטיביוטיקה מחודשת ועד למיצוי חומרים נוגדי סרטן צמחיים ורעלים ימיים - מתרחב במהירות.

מקורות חיצוניים (FLT:0Key) לקריאה נוספת: FLT:1

  • (FLT:0)Genome Biology and Evolution: Engineering Product Biosynthesis (2020)Felo: 1 - סקירה מקיפה של BGC מספקת ובחירת מארחת.
  • (FLT:0) טבע ביוטכנולוגיה: Machine Learning for מטבולית הנדסה (2021)03FLT) 1 - כיצד ML הופך אופטימיזציה לנתיב.
  • (FLT:0) ביקורות מתודולוגיות: מוצר טבעי מורכב מסנתות לעומת תסיסה (2016) ,ראה FLT:1 - ניתוח השוואתי של מסלולים כימיים וביולוגיים.