암세포는 무엇입니까?

암세포는 인간 종양 조직에서 파생된 세포의 immortalized 인구입니다. 그들은 생물 의학 연구를 위한 재생 가능하고 표준화한 자원 제공에서 무한하게 전파될 수 있습니다. 이 모형은 종양 발생의 분자 기계장치를, 시험 약 효능 및 낙관 개인화된 약을 시험하는, 발견되었습니다. 그러나, 모든 세포 선은 똑같이 창조되지 않습니다 &8212; 이 유전 안정성, 성장 kinetics, 그리고 특정 암 유형에 의존하는 암세포는 널리 이용됩니다.

어떤 연구자가에 대한 중요한 단계는 세포 line’s 특성을 일치시키는 실험적인 질문은 물었다. 가난한 선택 모델은 결과, 낭비 된 자원, 심지어 재전도에 이어질 수 있습니다. 암 세포 라인의 핵심 속성 이해는 통보 된 선택 만들기에 첫 번째 단계입니다.

Cell Line을 선택하면 고려할 수 있는 Key Factor

1. 암 유형과 조직 근원

가장 기본적인 선명은 세포 선이 조사의 밑에 암 유형에서 유래되어야한다는 것입니다. 예를 들면, 폐 아데노카신종 선 (예를들면 A549)를 가진 색전형 암을 공부하는 것은 불확실한 자료가 생성할 것입니다. 미국 유형 문화 수집 (ATCC)와 유럽 정통 세포 문화 (ECACC)의 유럽 수집과 같은 저장소는 상세한 근원 자료를 제공합니다. 조직 근원, histology 및 1 차적인 위치는 당신의 연구 초점에 일치합니다.

2. 유전과 분자 단면도

현대 암 연구는 종종 특정 mutations, 복사 번호 변경, 또는 유전자 표현 서명을 대상으로합니다. ATCC 또는 NCI-60 패널]의 세포 선은 광대하게 특징입니다. 예를 들어, BRAF] V600E 뮤테이션은 melanomas에서 일반적이므로, 연구자들은 HSB-BOT-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B-B

3. 성장 특성 및 문화 조건

다른 세포 선에는 명백한 투약 시간, 부착 필요조건 및 혈청 종속성 있습니다. (예를들면, HeLa, 투약 시간 ~24 시간)는 장기적인 차별화 학문을 위해 더 느린 선이 필요할지도 모르다 그러나, 고환 스크린을 위해 편리한 입니다. 몇몇 선은 중단 (예를들면, leukemia를 위해 HL-60)에서 성장하고, 다른 사람은 고착됩니다. 항상 당신의 실험실이 적합한 매체 (예를들면, RPM-1640와 DM40 보충 보충교재를 제공할 수 있다는 것을 확인합니다.

4. 인증 및 인증현황

HeLa Cell을 사용하는 크로스 컨테이트는 특히 유권한 문제입니다. 국제 셀 라인 인증위원회 (ICLAC)는 세포 선 정체성을 검증하기 위해 일상적인 탠덤 반복 (STR) 프로파일링을 권장합니다. 평판이 좋은 저장소는 STR 프로파일을 제공합니다. 연구원은 이러한 참조에 대한 재고를 비교해야합니다. 또한, 유전자 표현과 약물 응답을 변경할 수 있는 mycoplasma에 대한 테스트. 상업 키트 또는 PCR 기반 방법을 정기적으로 사용하십시오.

5. 재현성 및 게시 데이터

의 오랜 역사를 가진 세포 라인은 약리학 및 게놈 데이터의 풍부한 문학이 있습니다. MCF-7, 예를 들어, 수천 개의 모유 암 연구에서 고용되었으며 실험실에서 결과를 쉽게 비교할 수 있습니다. 그러나, 연속적 인 패딩은 유전 적 드리프트를 도입 할 수 있습니다. 신뢰할 수있는 소스 및 문서 통행 번호에서 낮은 패스 세이프를 사용합니다.

6. 약 감도 및 저항 단면도

연구가 화학 요법 또는 대상 에이전트를 포함 하는 경우, 기본 감도에 대 한 사전 스크린 세포 라인은 생명 이다. NCI-60 데이터베이스와 CancerRxGene 리소스 제공 하 고 화합물의 수백에 대 한 반-최대 억제 농도 (IC50) 값을. 저항 연구에 대 한, 열렬한 쌍 선 (내부 모체) 개인 및 공공 컬렉션에서 사용할 수 있습니다.

7. 윤리 및 근원 고려

모든 세포 선은 적절한 통보 동의와 기관적인 감독으로 얻어야 합니다. 인간 암 모형 이니셔티브 (HCMI)에서 그들과 같은 많은 현대 세포 선은, 상세한 환자 역사 및 윤리적인 승인으로 옵니다. 그들이 법적인 윤리적인 책임이 있을지도 모르기 때문에, 입증되지 않은 선을 사용하여 피하십시오.

질병 유형의 인기 암 세포 선

암모 암

  • MCF-7: Luminal A subtype, 에스트로겐 수용체 긍정적, endocrine 치료에 응답.
  • MDA-MB-231: 삼중성(기본형), 고침습, 종종 메타스타시스 연구에 사용됩니다.
  • T-47D: 루미날, 호르몬 신호 연구에 적합한 황체 호르몬 수용체 긍정적.

폐암

  • A549: 비소세포 폐암 (adenocarcinoma), 널리 약 검열 및 독성학에 사용됩니다.
  • H460: 대형 세포 엽종, xenograft 모델에 유용한 급속한 성장.
  • H1975: EGFR T790M 뮤테이션, 처음 세대 EGFR 억제제에 대한 저항을 공부하는 데 중요한.

색소 암

  • HT-29: Microsatellite 안정, 온건한 차이, 약물 테스트에 좋은.
  • HCT-116: 유전학 연구에 이상적인 Mismatch Repair deficient, 높은 뮤 스테이션 비율.
  • DLD-1: Multidrug 저항 메커니즘은 종종 조합 치료 연구에 사용됩니다.

다른 주목할만한 선

  • HeLa (cervical): 가장 오래된 침수 인간 세포 선, ubiquitous 그러나 오염을 피하기 위하여 정정되어야 합니다.
  • U87MG (glioblastoma): 뇌 종양 연구에서 일반적으로 사용되지만 기원과 정체성이 문제되었습니다. 주의를 사용하십시오.
  • PC-3 ( 전립선): 고형성, 고형성, 고급 전립선 암 연구에 사용되는 높은 대사.

인증 및 품질 관리 : 비-Negotiable 단계

암 연구에서 가장 일반적인 pitfalls 중 하나는 미분화 또는 오염 된 세포 라인을 사용하여입니다. 랜드 마크 연구는 세포 라인의 최대 36%가 교차 오염 된 것으로 추정됩니다. 엄격한 인증 프로토콜을 구현하면 데이터와 명성을 보호합니다. 주요 단계는 다음과 같습니다.

  • STR 프로파일링] 의 새로운 바이알은 장기적인 경작 중 정형적으로 thawed 및 주기적으로 입니다.
  • Mycoplasma 테스트 적어도 월; 상업 PCR 키트는 민감하고 신뢰할 수 있습니다.
  • ]단계 대조 현미경 검사에서 morphological changes를 실행합니다. 예상 교체는 오염을 나타냅니다.
  • 셀 라인 데이터베이스를 통과 번호, 성장 매체 및 인증 결과에 포함.

Nature Protocols 가이드라인은 STR 프로파일링 및 보고에 대한 표준화된 방법을 제공합니다.

특정 실험 목표에 대한 셀 라인 선택

높은 경도 Screening

약 발견 캠페인을 위해, 일관된 페형을 가진 튼튼한, 빠른 성장 선을 선정하십시오. NCI-60 패널은 수시로 시작점입니다. 표준 치료 약에 알려진 응답을 가진 잘 풀그릴 선을 사용하십시오.

유전자 편집 및 기능 게놈

CRISPR-Cas9 연구는 높은 감염 효율성 및 안정되어 있는 게놈 통합 수용량을 가진 세포 선을 요구합니다. HCT-116와 HEK293T (두 배 당 암 선이 아닙니다)는 대중적입니다. 암 별 편집을 위해, HCMI에서 환자 파생한 선을 고려하십시오.

Tumor Microenvironment와 Co-Culture 모델

목표가 스트로마 상호 작용 또는 면역 침전을 연구하는 경우에, 모노 컬 라인은 향미료가 없을지도 모릅니다. 섬유 폭발 또는 면역 세포 (예를들면 활성 T 세포를 가진 MDA-MB-231)로 공동으로 재배될 수 있는 선을 사용하십시오. 몇몇 선은 3D spheroid 또는 organoid 체재에, 더 생리적인 상황에 제공했습니다 적응되었습니다.

전통적인 2D 단층 라인은 암 연구의 솜씨를 유지하면서 종종 비보 생물학에 의거하지 못했습니다. 환자 파생 된 organoids (PDOs)와 xenografts (PDXs)를 향한 이동은 더 큰 번역적 재량성을 제공합니다. PDOs는 독창성 종양의 게놈 이질성 및 아키텍처를 유지하면서 개인화 된 약을 위해 강력하게 만듭니다. 그러나 그들은 더 복잡한 문화 조건을 필요로하며 높은 수준의 화면을 통해 더 적은 병용 할 수 있습니다.

3D 문화 플랫폼 (예 : Matrigel embedding, Hang Drop)을 채택하는 실험실은 여전히 assays의 예측 가치를 향상시킬 수 있습니다. 연구는 3D의 약물 응답이 종종 2D에서 다르며, 때로는 임상 결과를 더 잘 상관 관계가 있음을 보여줍니다.

셀 라인 선택에 대한 리소스

여러 데이터베이스와 저장소는 프로젝트에 최적의 셀 라인을 식별 할 수 있습니다.

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세포 선 정체성 및 특성을 검증하는 데 투자 시간이 대규모 연구에 투입되기 전에. 손에 올바른 모델로, 당신의 연구는 궁극적으로 환자에게 이익을 주는 믿을 수 있는, 충격적인 결과를 일으킬 가능성이 훨씬 더 있습니다.